无菌实验室装修设计细节及实验操作注意事项

在微生物工作中,菌种的接种移植是一项主要操作,这项操作的特点就是要保证菌种纯种,防止杂菌的污染。在一般环境的空气中,由于存在许多尘埃和杂菌,很易造成污染,对接种工作干扰很大。而无菌室的存在对于菌种的保护起到了很好的作用,减少了污染情况,所以无菌室也称接种室,是系统接种、纯化菌种等无菌操作的专用实验室。

一、无菌实验室装修设计细节

根据经济和科学的角度来讲,无菌实验室装修的基本要求如下:

(1)门应设在离工作台最远的位置上,内间应当设拉门,以减少空气的波动;外间的门最好也用拉门,要设在距内间最远的位置上。

(2)无菌实验室设计应有内、外两间,内间是无菌室,外间是缓冲室。房间容积不宜过大,以便于空气灭菌。内间面积2×2.5=5m2,外间面积1×2=2m2,

高以2.5m以下为宜,都应有天花板。

(3)无菌实验室容积小而严密,使用一段时间后,室内温度很高,故应设置通气窗。通气窗应设在内室进门处的顶棚上(即离工作台最远的位置),最好为双层结构,外层为百叶窗,内层可用抽板式窗扇。通气窗可在内饰使用后、灭菌前开启,以流通空气。有条件可安装恒温恒湿机。

(4)在分隔内间与外间的墙壁或“隔扇”上,应开一个小窗,作接种过程中必要的内外传递物品的通道,以减少人员进出内间的次数,降低污染程度。小窗宽60cm、高40cm、厚30cm,内外都挂对拉的窗扇。

二、无菌实验室实验操作注意事项

1.实验进行前,无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30-60分钟灭菌,以70%的酒精擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟后,才开始实验操作。

2.小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。

3.工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台(至少ClassII)。操作过程中,应避免引起气溶胶类物质的产生,小心毒性药品,例如DMSO及TPA等,并避免尖锐针头之伤害等。

4.接种针每次使用前后,必须通过火焰灼烧灭菌,待冷却后,方可接种培养物。

5.无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。实验用品以70%的酒精擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘的非无菌区域操作。

6.使用无菌瓶内的溶液是,不可将无菌敷料堵塞瓶口倾倒无菌溶液,或直接伸入溶液瓶内蘸取,以免污染剩余的溶液。

7.每次操作过程中,均应做阴性对照,以检查无菌操作的可靠性。

8.如有菌液洒在桌上或地上,应立即用5%石碳酸溶液或3%的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟,再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时,应立即脱去,高压蒸汽灭菌后洗涤。

9.无菌包内物品不慎污染或无菌包浸湿,外界微生物可渗入包内,造成污染,需重新消毒。

10.凡带有活菌的物品,必须经消毒后,才能在水龙头下冲洗,严禁污染下水道。

11.吸取菌液时,必须用吸耳球吸取,切勿直接用口接触吸管。

12.带有菌液的吸管,试管,培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒,24小时后取出冲洗。

13.戴手套时应注意未戴手套的手不可触及手套外面,而戴手套的手则不可触及未戴手套的手或另一手套的里面。戴手套后如发现破裂,应立即更换。脱手套时,须将手套口翻转胶下,不可用力强拉手套边缘或手指部分,以免损坏。

14.实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%的酒精擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后。

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